Orbit mini - プラグ＆ペイント
Orbit mini（オービットミニ）は、超小型のバイレイヤーワークステーションであり、人口脂質平面膜の 4ch 同時測定が可能です。Orbit mini は以下の優位性を有します。
- スタンドアローンの超小型ターンキーシステム
- 4ch の低ノイズアンプ内蔵
- 温度コントロールオプション - 自動冷却 & 加熱
- 最高のバンド幅による低ノイズ測定
- 4ch 同時測定によるスループット向上
- 専用の記録ソフトウェア同梱
- ターゲット分子は直接導入、または（プロテオ）リポソームとして融合
- イオンチャネル: 電位依存性 & リガンド依存性, 温度依存性
- ナノポア, 抗菌ペプチド, トキシンなど...
- MECAチップによる低コスト実験
Orbit mini は超小型の4chアンプを内蔵し、高いバンド幅による低ノイズ測定を実現しました。特別な追加設備は必要なく、どこでも脂質平面膜実験が行えます。さらに Orbit mini 独自のシステム設計により、測定チャンバー内の温度制御においてノイズ発生がありません。
Orbit mini の完全なプラットフォームは、4chアンプ（Elements社 s.r.l.）内蔵のレコーディングユニット、コンピュータ制御で測定チャンバーの動的冷却及び加熱を行う温度コントロールユニットから構成されます。Ionera社の MECA 4 ディスポ式測定チップはペインティング法による平面膜形成と4箇所の脂質平面膜の同時記録に使用します。
詳細情報:
オプション ＆ 特徴
Orbit mini 温度コントローラ
温度コントローラは冷却および加熱機能を搭載しており，チップの温度を 0℃～50℃の範囲で制御できます。
Orbit miniの温度制御実験例: α-ヘモリシンのポアに対するPEGによる阻害
(A) Current traces recorded at 10°C and 40°C illustrating a strong increase of the open pore current as well as the blockage frequency at elevated temperature.
(B) Event averaged histograms of the residual current during blockages. The open pore current scales with the temperature as well as the dwell time of the blockages.
(C) Dependence of the open pore current on the temperature.
(D) Dependence of the frequency of blockages on the temperature.
The image war kindly provided by Ionera Technologies GmbH
Orbit mini 蛍光顕微鏡取付キット
Orbit miniと蛍光顕微鏡を使用した実験には "蛍光顕微鏡取付キット" を使用します。キットには，下記対物レンズに適合するファラデーシールドと蛍光顕微鏡用のキャビティーサイズ 150 µmの "MECA4 FLUOチップ（製品コード 13 2004）"が同梱されています。その他の対物レンズへの対応状況はお問い合わせ下さい。
【Zeiss】 プラン-アポクロマート対物レンズ
W Plan Apochromat 20x（NA1.0, WD2.4）
W Plan Apochromat 40x（NA1.0, WD2.5）
W Plan Apochromat 64x（NA1.0, WD2.1） など
【Olympus】 UIS2対物レンズ（ノーカバー水浸）
UMPLFLN10XW（NA0.3, WD3.5）
XLUMPLFLN20XW（NA1.0, WD2.0）
LUMPLFLN60XW（NA1.0, WD2.0） など
【Nikon】 対物レンズ（水浸）
CFI Fluor 60×W（NA1.0 WD2.0）
CFI Apo 60×W NIR（NA1.0 WD2.8）
CFI Plan 100×W（NA1.1 WD2.5） など
Orbit mini オプション 製品ラインナップ
Orbit mini 温度コントローラ（製品コード: 12 2002）
Orbit mini ラップトップPC（製品コード: 12 2003）
Orbit mini リアルタイム統計解析ソフトウェア（製品コード: 12 2004）
Orbit mini 蛍光顕微鏡取付キット（製品コード: 12 2005）
ソフトウェア
Orbit mini EDR ソフトウェア
Orbit mini用のソフトウェアは、パートナー会社である Elements SRL社 (イタリア)で開発されました。直感的な操作で簡単にお使いいただけます。Orbit miniのソフトウェアの詳細は、こちらの動画をご覧下さい：
ソフトエアの更新：
EDR ソフトウェアの更新は Elements s.r.l 社のホームページからダウンロードして下さい。 Click here for Software downloads.
消耗品
MECA4 チップ
Orbit miniの実験に使用するMECA4チップには、不活性化ポリマーに2x2配列で円形マイクロキャビティーが配置されています。各キャビティーにはAg/AgCl微小電極が独立して統合されています。MECA4チップはpainting法によりファンクショナルな脂質二分子膜を高確率で形成可能で、グラミシジン、α-ヘモリシン、Kv1.3、Navなど、多岐に渡るイオンチャネルの包埋において既にバリデートされています。
MECA測定チップは、パートナー会社であるIonera Technologies GmbH社（ドイツ・フライブルク）で製造、品質管理がされ、ドイツミュンヘンから世界のユーザーへ発送されます。アプリケーションに合わせて、各種のMECAチップから最適なチップお選びいただけます。
MECA4 チップ ラインナップ
- MECA4 チップ 50µm：4ウェル測定チップ,キャビティー 50 µm (製品コード 132001)
- MECA 4 チップ 100µm：4ウェル測定チップ,キャビティー 100 µm (製品コード 132002)
- MECA 4 チップ 150µm：4ウェル測定チップ,キャビティー 150 µm (製品コード 132003)
- MECA 4 FLUOチップ 150µm：蛍光顕微鏡用4ウェル測定チップ,キャビティー 150 µm（製品コード 132004）
インタビュー & ケーススタディー
Prof. Dr. Chris Miller - Case Study about the Orbit mini
"Contrary to my initial expectations, the Orbit mini (red arrow) has performed exceptionally well for
our application, with vastly improved signal-tonoise characteristics over our best recordings on the home-built system."
“The compactness of the instrument makes for flexible and convenient placement in the lab. With a tiny footprint, it sits on a table or desk accompanied by only a laptop. In addition, bilayers are painted 'blind' with a teflon wand supplied by Nanion without observing the partition through a microscope. Thus, the
entire support-package of microscope, illuminator, Faraday cage, vibration-table, and rig-rack is eliminated. The acquisition software is intuitive and robust, and the data can be stored in formats readable by the Axon analysis programs that we routinely use. Moreover, the four electrically independent holes in the chip-partition means that four bilayers can be monitored simultaneously, thus quadrupling the probability of catching a clean single channel to record. This represents a significant, practical boost in experimental efficiency.”
Source: "Getting going with the Orbit mini planar bilayer system: A narrative"
From:
Prof. Dr. Chris Miller, Professor of Biochemistry, Investigator, Howard Hughes Medical Institute Member, US National Academy of Sciences, Brandeis University, Waltham, Massachusetts, USA
データ ＆ アプリケーション
Alpha-Hemolysin - Temperature Control
Orbit mini and applications:
Data were kindly provided by Ionera.
Temperature control of the Orbit mini: PEG induced current blockages of a alpha-hemolysin pore
(A) Current traces recorded at 10°C and 40°C illustrating a strong increase of the open pore current as well as the blockage frequency at elevated temperature.
(B) Event averaged histograms of the residual current during blockages. The open pore current scales with the temperature as well as the dwell time of the blockages.
(C) Dependence of the open pore current on the temperature.
(D) Dependence of the frequency of blockages on the temperature.
OccK1 - Outer Membrane Protein of the Pathogenic Bacterium Pseudomonas Aeruginosa
Orbit mini and applications:
Data were kindly provided by Ionera.
Representative recording from a single OmpF trimer showing current blocks due to the translocation of antibiotic Enrofloxacin, event averaged histogram.
Conditions: 150 mM KCl, 5 mM MES, pH 6, 10 mM enrofloxacin, + 60 mV
OmpF - Current block
Orbit mini and applications:
Data were kindly provided by Ionera.
Representative recording from a single OmpF trimer showing current blocks due to the translocation of antibiotic Enrofloxacin, event averaged histogram.
Conditions: 150 mM KCl, 5 mM HEPES, 5 mM MES, pH 6, 10 mM enrofloxacin, +60 mV
TRPA1 - Temperature Dependency
Orbit mini data and applications:
(A) Effect of temperature on TRPA1 activity
(B) The open probability (Po) versus the temperature and fitted with Boltzmann equation (EC50 was found at 14˚C).
The Arrhenius plot of the same data resulted in a Q10 of 46 (Literature: Q10 ~ 40).
VDAC - Application of Fluoxetine
Orbit mini and applications:
Data were kindly provided by Ionera.
Current recordings of single VDA channels from selected bilayers in parallel.
VDAC was reconstituted in DPhPC membranes and partially blocked upon the addition of Fluoxetine (Prozac).
(A) Representative parallel recording from 3 VDAC channels in DPhPC membranes. Conditions: 1 M KCl, 25 mM Tris, pH 7,5, voltage change protocol is given below.
(B) Current trace illustration partial blocade of VDAC by Fluoxetine (Prozac).
(C) Current-voltage trace of a single VADC channel under a ramping voltage of -70/+70 mV before (green) and after (blue) addition of 50 µm Fluoxetine
Purified VDAC sample is a generous gift from Prof. Stephan Nussberger to Ionera, Department Biophysics, University of Stuttgart, Germany
ウェビナー ＆ 動画
ウェビナー
28.06.2018 | Webinar: Artificial Lipid Bilayers in focus: Hand-held DNA-sequencing and biosensing with nanopores
Orbit mini and 
Orbit 16
Learn about single channel measurements in bilayer recording using the orbit instrument family
- Simplifying artificial bilayer experiments: Single-molecule experiments on micro-cavity arrays
- Hand-held DNA-sequencing and biosensing with nanopores
27.01.2016 | Webinar: Instant bilayers - just add protein
Orbit 16 and Orbit Mini
This webinar covers the use of the lipid bilayer platforms from Nanion: the Orbit16 and the Orbit mini for characterization of membrane proteins like ion channels, bacterial porins and biological nanopores. Both bilayer systems support high quality low noise recordings, but differ in throughput capabilities and experimental features. The Orbit16, introduced in 2012 is a device for efficient formation of 16 lipid bilayers simultaneously, allowing for parallel bilayer-reconstitution of ion channels and nanopores.
動画：チュートリアル
2018 - Simplifying artificial bilayer experiments: Single-molecule experiments on micro-cavity arrays
Orbit 16 and Orbit mini Oral Presentation
Presenter:
Dr. Conrad Weichbrodt, Product Manager Orbit instrument family, Nanion Technologies GmbH, Germany
Source:
Webinar: "Artificial Lipid Bilayers in focus: Hand-held DNA-sequencing and biosensing with nanopores", June 28, 2018
2015 - Orbit mini Membrane Preparation Tutorial Video
Orbit Mini
Short introduction how to prepare membranes on the Orbit mini
ダウンロード:
アプリケーションノート
製品カタログ
簡易マニュアル
Orbit mini - Quickstart Guide "Getting Started"
Orbit mini Quickstart Guide "Getting Started"
論文
2019 - Structure of the human ClC-1 chloride channel
Port-a-Patch, 
Vesicle Prep Pro and 
Orbit mini publication in PLOS Biology (2019)
Authors:
Wang K., Preisler, SS, Zhang, L., Cui, Y., Missel, JW., Grønberg C., Gotfryd, K., Lindahl E., Andersson, M., Calloe, K., Egea P.F., Klaerke D.A., Pusch M., Pedersen P.A., Zhou, Z.H., Gourdon, P.
2019 - Revisiting an old antibiotic: bacitracin neutralizes binary bacterial toxins and protects cells from intoxication (2)
Orbit mini publication in The FASEB Journal (2019)
Authors:
Schnell L., Felix I., Müller B., Sadi M., von Bank F., Papatheodorou P., Popoff M.R., Aktories K., Waltenberger E., Benz R., Weichbrodt C., Fauler M., Frick M., Barth H.
2019 - Purification of Functional Human TRP Channels Recombinantly Produced in Yeast
Orbit mini publication in Cells (2019)
Authors:
Zhang L., Wang K., Klaerke D.A., Calloe K., Lowrey L., Pedersen P.A., Gourdon P., Gotfryd K.
2019 - Electrophysiological Characterization of Transport Across Outer Membrane Channels from Gram-Negative Bacteria in Their Native Environment
Port-a-Patch, Vesicle Prep Pro and Orbit mini pre-publication in ChemRxiv (2019)
Authors:
Wang J., Terrasse R., Bafna J.A., Benier L., Winterhalter M.
2019 - Arg-8 of yeast subunit e contributes to the stability of F-ATP synthase dimersand to the generation of the full-conductance megachannel
Orbit mini publication in Journal of Biological Chemistry (2019)
Authors:
Guo L., Carraro M., Carrer A., Minervini G., Urbani A., Masgras I., Tosatto S.C.E., Szabò I., Bernardi P., Lippe G.
2018 - Structures of monomeric and oligomeric forms of the Toxoplasma gondii perforin-like protein 1
Orbit mini and Vesicle Prep Pro publication in Science Advances (2018)
Authors:
Ni T., Williams S.I., Rezelj S., Anderluh G., Harlos K., Stansfeld P.J., Gilbert R.J.C.
2018 - Small Molecule Permeation Across Membrane Channels: Chemical Modification to Quantify Transport Across OmpF
Orbit mini pre-publication in ChemRxiv (2018)
Authors:
Wang J., Bafna J.A., Bhamidimarri S.P., Winterhalter M.
2018 - Functional Analysis of Membrane Proteins Produced by Cell-Free Translation
Port-a-Patch and Orbit mini article in Protein Engineering (2018)
Authors:
Dondapati S.K., Wüstenhagen D.A., Kubick S.
2018 - Dynamics and number of trans-SNARE complexes determine nascent fusion pore properties
Orbit mini publication in Nature (2018)
Authors:
Bao H., Das D., Courtney N.A., Jiang Y., Briguglio J.S., Lou X., Roston D., Cui Q., Chanda B., Chapman E.R.
2017 - Molecular determinants of permeation in a fluoride-specific ion channel
Orbit mini in eLife (2017)
Authors:
Last .B., Sun S., Pham M.C., Miller C.
2017 - Engineering a pH responsive pore forming protein
Orbit mini and 
Vesicle Prep Pro publication in Scientific Reports (2017)
Authors:
Kisovec M., Rezelj S., Knap P., Cajnko M.M., Caserman S., Flašker A., Žnidaršič N., Repič M., Mavri J., Ruan Y., Scheuring S., Podobnik M., Anderluh G.
2016 - Mechanistic signs of double-barreled structure in a fluoride ion channel
Orbit mini publication in eLIFE (2016)
Authors:
Last N.B., Kolmakova-Partensky L., Shane T., Miller C.
ポスター
2016 - Next level toxicity screening: From single channel to overall cell behavior
Orbit mini, 
CardioExcyte 96 and 
SyncroPatch 384PE (a predecessor model of the SyncroPatch 384i) poster, Meeting of the French Society of Toxinology (SFET) 2015 
(0.9 MB)
